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    1. 顧滬,陳超陽,孟相秋,趙建增
      華威特(江蘇)生物制藥有限公司


          水貂出血性肺炎主要由銅綠假單胞菌(原稱綠膿桿菌)、肺炎克雷伯氏菌、及肺炎雙球菌、大腸桿菌等單獨或多種細菌混合感染引起的水貂呼吸道傳染病。該病發病急、病程2~3天,很快死亡,常呈地方性暴發流行。夏秋兩季,尤其是在7~9月份的水貂換毛期多發。水貂不分品種、年齡及性別均可感染本病,發病率和死亡率均在10%~50%。在我國,綠膿桿菌和肺炎克雷伯氏菌是導致出血性肺炎的主要病原,分別有50%及20%以上的病例與此二者有關,且常見兩者混合感染。


          一、病原體


          綠膿桿菌作為一種條件致病菌,存在于正常健康動物的機體內,飼養管理不當及環境衛生不良均可誘發本??;當機體受到應激或免疫力功能下降時,細菌就有機會感染機體。我國于1983年首次報道過該病原菌引起的水貂出血性肺炎,隨著我國水貂養殖業的發展,該病的爆發也越來越頻繁。2000-2014年,山東、吉林、遼寧、河北等省的各大養殖場均發生過由綠膿桿菌引起的出血性肺炎。采用日本生研血清分型系統,綠膿桿菌共分14種血清型(A~N型),流行病學調查顯示,我國的主要流行血清型為G型,約90%左右的感染與本型有關。其次是B型和C型,感染率分別為10%和2%左右。


          水貂肺炎克雷伯氏菌也是一種典型的條件致病菌,該菌普遍存在于自然界中,如水、土壤、空氣以及飼喂的食物中。過去人們認為該菌對畜禽的危害不大,一直沒有引起足夠的重視,但近幾年來肺炎克雷伯氏菌不僅對畜禽的危害越來越嚴重,引起毛皮動物(水貂、狐貍、貉子)的發病率也呈上升趨勢,已成為引發出血性肺炎的重要病原體,特別是與綠膿桿菌的混合感染。趙純德等在1987年首次報道了舟山市兩個貂場發生了肺炎克雷伯氏菌,此后國內陸續出現肺炎克雷伯氏菌引起毛皮動物發病的報道:2009年山東省海陽市某養貂場水貂發病并死亡,經確診由肺炎克雷伯氏菌導致;2013年山東諸城市某水貂養殖場共飼養水貂1500只,部分水貂出現食欲下降,呼吸困難,口鼻流血的臨床癥狀,6天內死亡100多只,經確診為肺炎克雷伯氏菌和綠膿桿菌混合感染。2012年,本項目組從山東一水貂養殖場死亡水貂的肺臟內分離到一株肺炎克雷伯氏菌,動物回歸試驗證實該菌株可引起水貂出血性肺炎,進一步證實了這種細菌的致病性及它的廣泛存在。


          二、診斷


          臨床診斷:突然出現食欲急劇下降或廢絕,精神沉郁,呼吸困難,腹式呼吸,就應懷疑本病。本病的病程短促,大部分發病后1~3天死亡,有的死前口吐血水,鼻腔流出血水。


          解剖病變:主要變現為肺臟病變,肺出血、充血、實變,有的有暗紅色出血塊,肺臟切面有血樣液體滲出;肝臟腫大,有出血點。


          實驗室診斷:


         (1)鏡檢:無菌取新鮮病死水貂肺臟涂片,革蘭氏染色,鏡檢,可見大量革蘭氏陰性桿菌。


         (2)細菌分離培養:用接種環無菌沾取病死水貂肺臟新鮮切面,劃線接種于普通營養培養基平板,37℃培養24小時。綠膿桿菌在普通瓊脂培養基平板上可見光滑、邊緣平坦、中央隆起的中等大小的菌落,菌落周圍培養基呈藍綠色。肺炎克雷伯氏菌在普通瓊脂培養基平板上形成乳白色、圓形、濕潤的菌落,用接種環挑單菌落易形成拉絲。


         (3)生化鑒定:綠膿桿菌的氧化酶、明膠液化,硝酸鹽產氣試驗為陽性,42℃生長。肺炎克雷伯氏菌的吲哚、MR、鳥氨酸脫羧酶試驗為陰性,VP、檸檬酸鹽、丙二酸鈉、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、ONPG試驗為陽性。


          三、預防與控制


          在沒有接種水貂出血性肺炎疫苗時,養殖場只能根據藥敏試驗情況,選擇抗生素治療疑似發病的水貂,但療效不佳,不能起到預防作用。2015年我國研制出了水貂出血性肺炎二價滅活疫苗,主要針對由G型、B型綠膿桿菌引起的感染,有比較好的預防效果。但是對肺炎克雷伯氏菌感染仍缺少專門的疫苗。


          金天明利用分離到的雞源克雷伯氏菌制備的滅活苗,免疫攻毒的保護率可達98.0%以上,免疫期達6個月;陳興生利用分離的牛源肺炎克雷伯氏菌制備的甲醛氫氧化鋁滅活苗,免疫后牛血清抗體可維持6個月,保護率為100%。這些結果提示,利用疫苗控制克雷伯氏菌是可行的,但目前關于毛皮動物肺炎克雷伯氏菌疫苗的研究尚屬空白。


          近些年,水貂出血性肺炎的發生主要以二重感染和多重感染為主,所以,在一定程度上,免疫單苗不能夠達到較好的預防效果,同時,多種單苗的共同使用會存在操作繁瑣,免疫禁忌等問題。因此,聯苗對預防由混合感染引發的水貂出血性肺炎有重要的意義。


          四、結語


          隨著細菌的耐藥性越來越嚴重,尤其是多重耐藥菌株的出現,利用各類抗生素治療細菌感染的效果將會越來越差,使治療細菌感染成為了棘手問題。防重于治、治不如防,可以預見疫苗接種將成為解決由綠膿桿菌、肺炎克雷伯氏菌混合感染引起水貂出血性肺炎的最有效方法之一。


      2016年03月28日

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